Sporen messen - in welchem Medium

Hallo!

Sporen würde ich immer messen in einem Medium, das die Vitalität nicht beeinträchtigt. Also mir langt da für gewöhnlich Wasser.

In Wasser würde ich auch den eventuellen vorhandenen Ölinhalt beurteilen.

Um dann die Konturen oder ein Ornament besser sichtbar zu machen, kann man ja später Reagenzien hinzufügen. z.B.für den Zellkern MELZER oder für Vakuolen Kresylblau.

Kresylblau wäre auch wichtig für Orbilia-Sporen, weil die den vital vorhandenen spore-body anfärben.

Also mit lethal wirkenden Mittelchen wie MELZER oder KOH- und SDS-haltigen Chemikalien zu messen, das würde ich lassen.

Zumindest muss man die Verwendung aber bei der Beschreibung seiner Ergebnisse dazuschreiben, das gibt sonst große Missverständnisse, weil sich oft die Sporenbreite und der Inhalt verändert.

Kann allerdings sein, dass solche Abweichungen bei Basidios nicht ganz so extrem sind wie bei Ascomyceten.

Viele Grüße

Ingo

Hallo zusammen

Ich messe Ascomyceten grundsätzlich in Leitungswasser. Bei Basidiomyceten mit braunen, ornamentierten Sporen (Galerina, Hebeloma, Cortinarius usw.) ist in 3%iger KOH das Ornament etwas kontrastreicher. Bei kleinen hyalinen Sporen setze ich, wenn es anders nicht vernünftig zu sehen ist, wenig wässerige Lsg. von Kongorot zu. Sporen von Sprödblättlern messe ich nur in Melzer, wenn ich zu wenige Sporen habe.

LG Karl

Hallo,

zunächst mal muss man doch unterscheiden, ob man Frischmaterial untersucht oder Herbarmaterial.

Bei Frischmaterial ist immer Wasser die beste Lösung, bei inoperculaten Discomyceten sogar +/- zwingend.

Farblose Sporen mikroskopiere ich meist in Kongorot (egal ob in NH3 oder in H2O) und mache es da auch oft so dass ich nur eine Spur Kongorot in den Wassertropfen ziehe um eine entsprechende Verdünnung zu erzielen. In Kongorot färben, Farbstoff abziehen und durch Wasser (GSM, Milchsäure, ....) ersetzen ist zwar theoretisch gut von der Färbungswirkung her, aber man zieht sich eine Menge freier Sporen aus dem Präparat dabei.

Melzers verwendet man dann wenn die Frage nach Amyloidität oder Dextrinoidität im Raum steht. Also auch bei Cortinarius, Hebeloma, Galerina. Ob man dann auch gleich die Sporenmaße nimmt, hat meiner Erfahrung nach keinen Einfluss auf die ermittelten Werte bei den Braunsporern.

Aufpassen muss man aber immer dann, wenn man Farbstoffe verwendet die (auch) das Zellplasma anfärben. Also Phloxin, Melzers, Baumwollblau (bei nicht-cyanophilen Sporen) und ähnliches. Denn es kann sein dass sich die Wand schlechter oder gar nicht färbt, der Inhalt dagegen schon. Dann kommt man zu zu kleinen Messwerten. Besonders ist dies die Gefahr bei Herbarmaterial das nicht richtig aufgequollen ist.

Herbarmaterial färbe ich immer mit Kongorot (NH3). Wenn das nicht reicht zum Aufquellen, dann quelle ich erst in KOH 3 % und färbe dann mit einer Spur Kongorot an. Aufquellen mit Wasser hat bei mir noch nie funktioniert, ich versuche das schon gar nicht mehr.

Tests auf Amyloidität, Dextrinoidität, Cyanophilie, Metachromasie und Porus-Reaktionen lege ich immer direkt ins Reagenz ein, ohne vorher KOH zu verwenden. Dann spannt zwar das Gewebe oft nicht richtig auf, aber darum gehts ja dann in diesem Präparat auch nicht, sondern nur um den Nachweis einer entsprechenden Reaktion.

Man muss also oft mehrere verschiedene Präparate machen, bis man alle Merkmale seines Pilzes zusammen hat!

Eventuell ist es auch wichtig sich bei einer Monographie mal den Methodik-Teil durchzulesen, wenn man Dinge nachvollziehen will, und dann zu Vergleichszwecken eben nach dieser Methodik zu mikroskopieren auch wenn mans sonst anders macht.

beste Grüße,

Andreas

Hallo Bernd,

Kongorot/SDS verträgt sich nicht mit KOH, und da ich viel mit Herbarmaterial arbeite, insofern auch viel in KOH aufquelle, benutze ich Kongorot/SDS eigentlich nie. Bei Frischmaterial kann man ebensogut auch Kongorot/Wasser nehmen, dann vermeidet man das Schäumen vom SDS wenn man das Fläschchen mal etwas schüttelt.

Da die Färbeeigenschaften von Kongorot in allen Medien dieselbe ist, hat das Lösungsmedium nur die Aufgabe wie weich und aufnahmefähig das Gewebe dadurch wird. Das ist bei NH3 und bei SDS natürlich etwas besser als in reinem Wasser. Bei Frischmaterial aber völlig egal und insofern einfach eher Geschmacksache.

beste Grüße,

Andreas

Hi Pablo!

Kannst ja erst messen und dann anfärben.

Mit Kongorot-SDS oder KOH-Vorbehandlung z.B. kriegst du viele kleine Öltröpfchen unter Umständen dazu, dass sie in große zusammenlaufen. Vielleicht stört das dann weniger bei der Ornamentbeurteilung.

Bildung von großen Tropfen hat man oft bei Vitalitätsverlust, deshalb ist es manchmal an Exsikkaten gar nicht so einfach festzustellen, wie das ursprüngliche vitale Aussehen der Tropfen (Öl, Vakuolen) in den Sporen mal war.

VG Ingo W